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小鼠白介素5elisa试剂盒

产品名称:小鼠白介素5elisa试剂盒

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产品产地:中国大陆

访问次数:225

简介内容:小鼠白介素5elisa试剂盒实验原理:试剂盒采用elisa检测方法,使用了两种高特异性的抗体测定靶蛋白,以TMB作为显色剂,显色的强度与样本中靶蛋白的量成正比。

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    小鼠白介素5elisa试剂盒

       小鼠白介素5elisa试剂盒实验原理: 
      试剂盒采用elisa检测方法,使用了两种高特异性的抗体测定靶蛋白,以TMB作为显色剂,显色的强度与样本中靶蛋白的量成正比。

      试剂盒组成:

      1. 微孔板 (固相抗体)   96 well

      2. 标记抗体 (30倍浓缩,HRP标记抗体) 0.4 ml

      3. 标准品 0.5 ml × 2

      4. EIA缓冲液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 30 ml

      5. 标记抗体稀释液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 12 ml

      6. 显色液 (TMB底物液)  15 ml

      7. 终止液 (1N硫酸)     12 ml

      8. 洗涤缓冲浓缩液 (40倍浓缩,0.05% Tween-20的磷酸缓冲液)    50 ml

      小鼠白介素5elisa试剂盒检测程序:

      1.建立标准曲线:设标准孔8孔,每孔中各加入样品稀释液100ul,*孔加标准品100ul,混匀后用加样器吸出100ul,移至第二孔。如此反复作对倍稀释至第六孔,*后,从第六孔中吸出100ul弃去。第七孔为空白对照,第八孔为零孔。
      2.加样:待测品孔每孔各加入待测样品100ul混匀。
      3. 将反应板充分混匀后粘上封板纸置37 oC 120分钟。
      4. 洗板:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
      5. 每孔(除零孔)加*抗体工作液50ul,置37℃ 60分钟。
      6. 洗板:操作同4。
      7. 每孔(除零孔)加酶标抗体工作液100ul(两滴),将反应板置37 oC 60分钟。
      8. 洗板:同前。
      9.每孔加入底物液A、B各一滴,置37 oC避光反应15分钟。
      10. 终止:每孔加入1滴终止液混匀。
      11. 测定:在450nm处测吸光值。
       小鼠白介素5elisa试剂盒的应用:

      1.免疫酶染色各种细胞内成分的定位。

      2.研究抗酶抗体的合成。

      3.显现微量的免疫沉淀反应。

      4.定量检测体液中抗原或抗体成分。

      技术原理
      试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。人肝素结合性表皮生长因子HB-EGF由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
      抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
      酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。

      受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体。
      此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
      加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术

        小鼠白介素5elisa试剂盒样本处理

      在收集标本前需有一个完整的计划,需要清楚要检测的成份是否足够稳定。ELISA检测提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。

      计算
      以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

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    南京金益柏公司地址位于南京市白下高新技术产业

      【主营业务】品种繁多 满足客户多种科研需求 

      公司主营业务有:ELISA试剂盒、检测试剂盒、分子生物学、实验仪器、实验技术服务以及耗材等。

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      ②分子生物学:多肽、保护氨基酸、试剂-抗生素、标准品、细胞类、染色类、免疫类、核酸类、标准物质、蛋白类、常规溶液、Amresco

      ③实验仪器Eppendorf移液器、Thermofisher移液器。   

      ④实验技术服务:ELISA实验、WB、免疫组化、免疫荧光、PCR、流式、HE染色、硕士、博士毕业课题、基金项目课题、SCI课题(发表)、医院课题服务。   

      ⑤耗材分为:康宁CORNING、Axygen。

      【合作单位】和多家国际知名生物公司品牌保持合作关系

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